1 Sequencing depth/coverage
测序深度:每碱基被测序的平均次数。
计算公式:\(\text{Coverage}=\frac{\text{总测序碱基数(bp)}}{\text{目标基因组或转录组大小(bp)}}\)。
例如:人类基因组大小约 3Gb (\(3 \times 10^9\)bp),若测 60Gb 数据,则 \(\text{Coverage}=\frac{60 \times 10^9}{3 \times 10^9}=20 \times\)。
2 Sequencing saturation analysis
X 轴:通常为测序深度或累计数据量(如 the number of reads)。
Y 轴:
- 反映信息量的捕获效率,如基因检出数、变异检出数等。
- 评估技术稳定性,如技术重复间的一致性。
例如:
在转录组测序中,用于表示随着测序深度的增加(累计 reads 数增加),新鉴定的基因或转录本数量的变化关系。
在转录组测序中,用于表示随着测序深度的增加(累计 reads 数增加),技术重复间的表达量相关系数的变化关系。
在基因组测序中,表示随着测序深度的增加,基因组中被至少覆盖 X 次的碱基所占比例。
在基因组测序中,表示随着测序深度的增加,已知变异的检出率。
在 scRNA-Seq 中,随着测序深度的增加,单个细胞中检测到的基因数。
在 scRNA-Seq 中,随着测序深度的增加,doublets 的比例。